Análisis de PCR

Tema: IMPLEMENTACIÓN DE UNA PCR-MULTIPLEX PARA LA IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE LOS POLIMORFISMOS EN LOS GENES HNF1-a y HNF4-a

Objetivo: Diseñar una PCR-Multiplex-DGGE, para determinar mutaciones en los genes HNF1-a y HNF4a.

Muestra: de sangre total mediante el Kit Wizard Genomic DNA purification

Tipo de Ácido Nucleico: DNA genómico

EXTRACCIÓN:

Lisis: Kit Wizard Genomic DNA purification

Separación: Kit Wizard Genomic DNA purification

Purificación: Kit Wizard Genomic DNA purification

Gen a amplificar: HNF-4alfa y HNF1a, que se encuentran en el GenBank

Tipo de PCR: PCR-Multiplex

 Desnaturalización:                               94°C                   30 segundos

 Hibridación:                                         61°C                   30 segundos

 Extensión:                                             72°C                   30 segundos                    

 Extensión Final                                      72°C                    7 minutos
 38 CICLOS 

Visualización: EFO

http://www.archivos.ujat.mx/dip/Nueva%20carpeta/sem%20divul/2007/dacs.pdf